Тезисы докладов. IV ВСЕРОСИЙСКИЙ СЪЕЗД ТРАНСПЛАНТОЛОГОВ памяти академика В.И. Шумакова. 9-10 ноября 2008 г. г.Москва

КЛИНИКО-НЕЙРОФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЭФФЕКТОВ ТРАНСПЛАНТАЦИИ АУТОЛОГИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК (СD34+,СD45-) ПАЦИЕНТАМ С ХРОНИЧЕСКОЙ ТРАВМАТИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СПИННОГО МОЗГА

Брюховецкий А.С., Фролов А.А., Фадеев А.В.

ЗАО Клиника восстановительной интервенционной неврологии и терапии «НейроВита», Москва

В настоящее время трансплантация стволовых клеток считается одним из перспективных методов лечения травматической болезни спинного мозга (ТБСМ). Имеется ряд сообщений об успешном лечении ТБСМ с помощью клеточной восстановительной терапии. Подавляющее большинство подобных сообщений ограничивается описанием отдельных случаев. Объективизация данных с помощью инструментальных методов исследования не представлена, либо проводилась на несистематической основе. Среди описанных случаев превалируют наблюдения ТБСМ в остром периоде, когда на фоне бурного течения спонтанных восстановительных процессов эффект от трансплантации стволовых клеток не может быть четко идентифицирован. Целью настоящего исследования является комплексное изучение эффектов клеточной нейрорегенераторной терапии на функцию поврежденных структур спинного мозга у больных с хронической ТБСМ.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Проводилось динамическое наблюдение за 24 пациентами с хронической ТБСМ (уровень C4-L1) при повторных - в среднем один раз в 3 месяца - интратекальных трансплантациях CD34+ клеток. В течение всего периода наблюдения (1-1,5 года) хирургических вмешательств не было. Всем пациентам каждые 3 месяца проводилось: клиническое неврологическое обследование, инструментальные исследования: соматосенсорные вызванные потенциалы, моторные вызванные потенциалы (транскраниальная магнитная стимуляция), электромиографическое исследование.

Сбор стволовых (CD34+.CD45-) клеток осуществляли на 4 день стимуляции гранулоцитарным колониестимулирующим фактором на проточном клеточном сепараторе крови COBE-Spectra (США). Криоконсервирование проводилось с 10% раствором диметилсульфоксида в жидком азоте. Непосредственно перед применением CD34+ клетки размораживали и отмывали 0,9% раствором NaCl. Интратекальные трансфузии проводились в дозе 5 х 106 по CD34+.CD45- с помощью люмбальной пункции на уровне L2-L3 или L3-L4 позвонка.

Соматосенсорные вызванные потенциалы (ССВП), Электромиография (ЭМГ) и Моторные вызванные потенциалы (МВП) проводились на приборе Keypoint Medtronic (США). Транскраниальная магнитная стимуляция осуществлялась Mags2 Schwarzer (ФРГ). При записи ССВП активный электрод располагался на поверхности скальпа согласно международной системе «Ю-20%»: в точке Cz при стимуляции большеберцового нерва, в точке СЗ при стимуляции правого срединного нерва и в точке С4 при стимуляции левого срединного нерва. Референтный электрод располагался в точке Fz. Вызванный моторный ответ регистрировался в мышцах рук m. adductor digiti minimi с двух сторон во время 100% транскраниальной стимуляции первичной моторной коры контралатерального полушария мозга. Электромиографическое исследование большеберцового нерва проводилось по стандартной методике.

РЕЗУЛЬТАТЫ.

1. Клинические признаки восстановления нарушенных функций отличались индивидуальными особенностями. У разных пациентов преимущественный эффект воздействия стволовых клеток проявлялся в двигательной, чувствительной сферах, либо в восстановлении контроля над тазовыми функциями. В двигательной сфере превалировал эффект снижения уровня дисфункции на 1-2 и более сегментов спинного мозга (48%). У пациентов с шейным уровнем травмы и неполным перерывом спинного мозга, как правило, в первую очередь восстанавливался произвольный контроль над мышца-ми туловища (71.2%). У ряда пациентов отмечалось восстановление тазовых функций, в основном в виде появления ощущения наполненности мочевого пузыря (46%). У отдельных пациентов восстановился контроль над тазовыми функциями. У некоторых пациентов отмечалось восстановление половой функции. В чувствительной сфере отмечалось увеличение площади зон частичной сохранности ниже сенсорного уровня дисфункции и снижение сенсорного уровня на несколько сегментов (62%).

2.В ССВП, полученных при стимуляции срединного нерва у пациентов с уровнем травмы С5-С7 (N=11) доминировал эффект увеличения амплитуды ранних компонентов - в среднем на 37% по отношению к исходному уровню. У 8 из 11 больных отмечалось увеличение амплитуды более чем на 1 мкВ. Подобного уменьшения ССВП не отмечалось ни у одного из пациентов. В ССВП, полученных при стимуляции нижних конечностей доминировал эффект уменьшения латентности ВП (в среднем на 2 мс), свидетельствующий об увеличении скорости проведения нервного импульса по спинальным путям проприоцептивной чувствительности. У 5 пациентов обнаружилось восстановление ранее отсутствующих компонентов ССВП.

3.По данным МВП у 2 пациентов отмечалось увеличение амплитуды вызванного моторного ответа и уменьшение времени центрального моторного проведения. Выявлен нелинейный характер динамики изменения параметров проведения как по афферентным (по данным ССВП), так и по эфферентным (по данным МВП) спинномозговым путям.

4.По данным ЭМГ отмечалась стабилизация состояния периферических моторных нервных волокон.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

Комплексное клиниконейрофизиологигеское исследование эффектов нейрорегенераторной терапии хронической ТБСМ выявило ряд особенностей воздействия стволовых клеток на поврежденные структуры спинного мозга. Количественная оценка функции проводников спинного мозга подтверждает клинические наблюдения полиморфизма динамики восстановления утраченных функций. Эти данные являются еще одним аргументом в пользу концепции о способности стволовых клеток концентрироваться и действовать в области огагов поражения, вне зависимости от локализации последних. Нелинейность и неидентигность динамики анализируемых показателей у различных пациентов указывает на то, гто механизм действия стволовых клеток на нервную ткань является многокомпонентным и зависящим от многих факторов. Данные исследования ССВП показывают, гто одним из механизмов действия стволо-вых клеток CD34+.CD45- на хронигески поврежденный спинной мозг является ремиелинизация нервных волокон.